คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับแอนติบอดี G12

ลำดับเปปไทด์ใดที่แอนติบอดี G12 จำได้?

แอนติบอดี G12 ถูกสร้างขึ้นเพื่อต่อต้านเปปไทด์ 33-เมอร์ที่มีความเป็นพิษต่อภูมิคุ้มกันสูงของโปรตีน α-gliadin ซึ่งกระตุ้นให้เกิดโรคเซลิแอค (Morón et al., 2008)โดยเฉพาะอย่างยิ่ง บริเวณที่เกิดการจดจำภายใน 33-mer คือ epitope แบบเฮกซาเมอร์ QPQLPY ลำดับการจดจำนี้ซ้ำกันสามครั้งภายในเปปไทด์ 33-mer ของกลิอาดิน แอนติบอดี G12 จดจำโปรลาไมน์ที่มีพิษต่อภูมิคุ้มกันจากข้าวสาลี ข้าวบาร์เลย์ ข้าวไรย์ และจากข้าวโอ๊ตบางสายพันธุ์ (Morón et al., 2008)แอนติบอดี G12 ยังสามารถทำปฏิกิริยากับเอพิโทปอื่นๆ ที่พบในโปรลาไมน์ที่เป็นพิษอื่นๆ เช่น QPQLPF, QPQLPL, QPQQPY, QPQQPF (Morón et al. 2008; และ Real et al. 2014)

แอนติบอดี G12 ตอบสนองเฉพาะกับ 33-mer ของ α-gliadin เท่านั้นหรือไม่?

ไม่ใช่ครับ/ค่ะ แอนติบอดี G12 สามารถทำปฏิกิริยากับลำดับที่คล้ายกันซึ่งพบในกลิอะดินชนิดอื่น (โอเมก้า, อัลฟา, แกมมา และเบต้า) และในกลูเตนินได้เช่นกัน โปรไฟล์การจดจำของ G12 ได้รับการศึกษาและอธิบายไว้อย่างละเอียดแล้ว (Morón et al., 2008a, Morón et al., 2008b, Real et al., 2014)มีเปปไทด์อื่น ๆ ที่อาจทำปฏิกิริยากับ G12 ซึ่งพบได้ในเปปไทด์ที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกันในข้าวสาลี ข้าวบาร์เลย์ และข้าวไรย์ ได้แก่ QPQLPY, QPQQPY, QPQQPF, QPQLPF, QPQLPL, QPELPY

G12 สามารถตรวจจับกลูเตนในเบียร์และวัสดุที่ผ่านการไฮโดรไลซ์อื่น ๆ ได้หรือไม่?

ในวัสดุที่ถูกไฮโดรไลซ์ เช่น เบียร์ สัดส่วนสัมพัทธ์ของเปปไทด์ที่ไวต่อการเกิดปฏิกิริยาสำหรับผู้ป่วยโรคเซลิแอคอาจแตกต่างกัน เนื่องจากความหลากหลายของประชากรเปปไทด์ที่เกิดขึ้นหลังการหมัก ในสิ่งพิมพ์เมื่อไม่กี่ปีที่ผ่านมา (Comino et al., 2012) ได้มีการวิเคราะห์เบียร์หลากหลายชนิดโดยใช้วิธีการสองวิธีที่แตกต่างกันซึ่งอิงกับแอนติบอดี G12 (Competitive ELISA และ lateral flow immunoassay) ซึ่งให้ผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกันต่อมา (Real et al., 2014) ได้มีการแสดงให้เห็นว่าเบียร์ที่ติดฉลากว่าปราศจากกลูเตนตามกฎหมาย (ระดับกลูเตนที่ตรวจไม่พบโดยวิธี Competitive ELISA R5) มีส่วนประกอบของเปปไทด์กลูเตนซึ่งตรวจพบโดยวิธี ELISA G12 และแมสสเปกโตรเมตรี ซึ่งสามารถระบุเปปไทด์ที่เป็นพิษต่อภูมิคุ้มกันสำหรับผู้ป่วยโรคซีลิแอคได้ การค้นพบนี้ทำโดยการนำเซลล์ของระบบภูมิคุ้มกันจากผู้ป่วยโรคซีลิแอคมาสัมผัสกับเปปไทด์เหล่านี้และวัดการตอบสนองของเซลล์การศึกษาล่าสุด (Picariello et al., 2015) ได้วิเคราะห์ตัวอย่างของ WeissbIer (เบียร์ข้าวสาลี) และตรวจพบ epitopes ที่ก่อให้เกิดพิษต่อระบบภูมิคุ้มกันด้วย G12 พวกเขาได้วิเคราะห์เบียร์เหล่านี้ด้วยซีรั่มของผู้ป่วยโรคเซลิแอคเป็นแหล่งของแอนติบอดีต่อกลิอาดิน ซึ่งยืนยันว่าเบียร์ข้าวสาลีมีเปปไทด์ที่มีความสามารถในการทำปฏิกิริยากับซีรั่มจากผู้ป่วยโรคเซลิแอค

มีเพปไทด์กลูเตนมากกว่า 1000 ชนิดที่รู้จักกันว่ามีคุณสมบัติกระตุ้นภูมิคุ้มกัน G12 สามารถจดจำได้ทั้งหมดหรือไม่

การตรวจจับเปปไทด์ทั้งหมดนี้ด้วยแอนติบอดีเพียงตัวเดียวแทบจะเป็นไปไม่ได้เลย อย่างไรก็ตาม การศึกษาล่าสุด (Moreno et al., 2016) ได้แสดงให้เห็นว่าเปปไทด์ที่มีความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันมากที่สุด (รับผิดชอบต่อ 80-95% ของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของเซลล์ T ในผู้ป่วยโรคซีลิแอค) ทำปฏิกิริยากับ G12ในทางตรงกันข้าม แอนติบอดีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจหา gluten คือ R5 สามารถจดจำได้เพียงประมาณ 25% ของเพปไทด์ที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกันเหล่านี้ในเบียร์ข้าวบาร์เลย์ ความสัมพันธ์ระหว่างปฏิกิริยาของ G12 กับภูมิคุ้มกันของเซลล์ T ได้รับการศึกษาอย่างมากในอาหารที่ยากต่อการวิเคราะห์หลายชนิด เช่น ข้าวโอ๊ตบริสุทธิ์หรือข้าวบาร์เลย์สายพันธุ์ต่างๆ (Comino et al., 2011, Comino et al., 2012)

ข้าวโอ๊ตปลอดภัยสำหรับผู้ป่วยโรคเซลิแอคหรือไม่? พวกมันปลอดกลูเตนจริงหรือ?

ข้าวโอ๊ตมักประสบปัญหาการปนเปื้อนข้าม (ทั้งในไร่และ/หรือระหว่างกระบวนการผลิต) อย่างไรก็ตาม แม้ข้าวโอ๊ตจะได้รับการปลูกและแปรรูปอย่างพิถีพิถัน ก็ไม่ได้หมายความว่าจะถือว่าเป็นอาหารปราศจากกลูเตนเสมอไป งานวิจัยในปี 2011 (Comino et al., 2011) พบว่าข้าวโอ๊ตแต่ละชนิดมีปริมาณเปปไทด์ที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกันต่อกลูเตนไม่เท่ากันข้าวโอ๊ตทุกสายพันธุ์มีสารอาเวนิน (avenin) แต่แต่ละสายพันธุ์มีลำดับและโครงสร้างที่แตกต่างกัน และเพียงบางสายพันธุ์เท่านั้นที่อาจเป็นความเสี่ยงต่อผู้ป่วยโรคเซลิแอค กลูเตนจากข้าวโอ๊ตแต่ละสายพันธุ์ถูกนำไปทดสอบกับเซลล์จากผู้ป่วยโรคเซลิแอค และเซลล์เหล่านั้นตอบสนองอย่างเหมาะสม โดยจะตอบสนองเฉพาะกับข้าวโอ๊ตสายพันธุ์ที่มีศักยภาพในการก่อให้เกิดพิษต่อภูมิคุ้มกันเท่านั้นดังนั้น แอนติบอดี G12 จึงเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสำหรับบริษัทใด ๆ ที่ทำงานกับข้าวโอ๊ตที่ปราศจากกลูเตน งานวิจัยอื่น ๆ (Real et al., 2012; Comino et al., 2016, Silano et al., 2013) ได้ศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับความแตกต่างของข้าวโอ๊ตเหล่านี้และภูมิคุ้มกันที่เกิดขึ้นไม่ว่าในกรณีใด กลูเตนจากข้าวสาลีมีปฏิกิริยาต่อ G12 มากกว่าข้าวโอ๊ตที่มีความไวสูงสุดอย่างน้อย 40 เท่า อาจเป็นไปได้ว่าเฉพาะผู้ป่วยโรคเซลิแอคที่มีความไวสูงที่สุดเท่านั้นที่จะได้รับผลกระทบจากข้าวโอ๊ตที่มีความไวสูงสุด การศึกษาในอนาคตจะชี้แจงระดับเกณฑ์ของข้าวโอ๊ตที่มีเปปไทด์ก่อภูมิแพ้กลูเตนซึ่งมีผลกระทบต่อสุขภาพของผู้ป่วยโรคเซลิแอค

ผู้ป่วยโรคเซลิแอคกำลังรับประทานอาหารที่ปราศจากกลูเตน มีวิธีง่าย ๆ ที่จะรู้หรือไม่ว่าพวกเขากำลังทำถูกต้องหรือไม่?

จนกระทั่งเมื่อไม่นานมานี้ วิธีเดียวในการประเมินการปฏิบัติตามอาหารปลอดกลูเตนคือการตรวจชิ้นเนื้อ ซึ่งทั้งมีค่าใช้จ่ายสูง รุกรานร่างกาย และไม่น่าพึงพอใจ หรือการตรวจทางซีรั่มวิทยา ซึ่งตามการศึกษาหลายฉบับพบว่ามีความแม่นยำไม่เพียงพอ (Kaukinen et al., 2002; Tursi et al., 2003; Moreno et al., 2015;(Comino et al., 2016) และมักนำไปสู่ผลบวกลวงหรือผลลบลวงได้บ่อยครั้ง เมื่อกลูเตนถูกรับประทานเข้าไปและเข้าสู่ทางเดินอาหาร กลูเตนจะถูกย่อยสลายเป็นชิ้นส่วนที่เล็กกว่า เรียกว่า เปปไทด์ และในที่สุดกลายเป็นกรดอะมิโน เปปไทด์บางชนิด (เช่น 33-mer) มีความทนทานต่อการย่อยสลายนี้และยังคงสภาพเดิมอยู่พวกมันผ่านเยื่อเมือกและในผู้ป่วยโรคซีลิแอคจะกระตุ้นการตอบสนองของโรคซีลิแอค เปปไทด์เหล่านี้จะถูกขับออกทางปัสสาวะและอุจจาระ และการตรวจพบในตัวอย่างทั้งสองชนิดนี้เป็นหลักฐานโดยตรงของการบริโภคกลูเตน การศึกษาล่าสุดที่เกี่ยวข้องกับผู้ป่วยโรคซีลิแอค 188 ราย พบว่าประมาณ 40% มีระดับเปปไทด์กลูเตนที่ตรวจพบได้ในอุจจาระ การศึกษานี้ใช้แอนติบอดี G12 จาก Hygiena เพื่อตรวจหาเปปไทด์กลูเตน

• "ความหลากหลายในศักยภาพการกระตุ้นภูมิคุ้มกันของข้าวโอ๊ต: ฐานสำหรับการคัดเลือกสายพันธุ์ข้าวโอ๊ตที่ไม่มีความเป็นพิษในโรคเซลิแอค" Comino I, Real A, de Lorenzo L, Cornell H, López-Casado MÁ, Barro F, Lorite P, Torres MI, CebollaA, Sousa C.Gut2011 Jul;60(7):915-22.
• "ลักษณะทางโมเลกุลและภูมิคุ้มกันของโปรตีนกลูเตนที่แยกได้จากสายพันธุ์ข้าวโอ๊ตที่มีความแตกต่างกันในด้านความเป็นพิษต่อโรคเซลิแอค"Real A, Comino I, de Lorenzo L, Merchán F, Gil-Humanes J, Giménez MJ, López-Casado MÁ, Torres MI, Cebolla Á, Sousa C, Barro F, Pistón F.PLoS One2012;7(12):e48365.
• "การระบุตัวและการจำแนกลักษณะโมเลกุลของเปปไทด์จากข้าวโอ๊ตที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในโรคเซลิแอค" Comino I, Bernardo D, Bancel E, de Lourdes Moreno M, Sánchez B, Barro F, Šuligoj T, Ciclitira PJ, Cebolla Á, Knight SC, Branlard G, Sousa C.Food Nutr Res. 2016 Feb 5;60:30324.
• "การตรวจจับอย่างไวของส่วนประกอบของธัญพืชที่เป็นพิษต่อผู้ป่วยโรคเซリアก์โดยใช้แอนติบอดีโมโนโคลนอลต่อเพปไทด์ที่เป็นภูมิคุ้มกันหลักของข้าวสาลี" Morón B, Cebolla A, Manyani H, Alvarez-Maqueda M, Megías M, Thomas Mdel C, López MC, Sousa C.Food Nutr Res.2008 Feb;87(2):405-14.
• "การประเมินความเป็นพิษของอาหารสำหรับผู้ป่วยโรคเซลิแอค: การศึกษาลักษณะของแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลต่อเพปไทด์กลูเตนหลักที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกัน" Morón B, Bethune MT, Comino I, Manyani H, Ferragud M, López MC, Cebolla A, Khosla C, Sousa C.PLoS One. 28 พฤษภาคม 2008;3(5):e2294.doi: 10.1371
• "ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในพิษต่อภูมิคุ้มกันของข้าวบาร์เลย์พันธุ์ต่างๆ" Comino I, Real A, Gil-Humanes J, Pistón F, de Lorenzo L, Moreno Mde L, López-Casado MÁ, Lorite P, Cebolla A, Torres MI, Barro F, Sousa C.Mol Nutr Food Res.2012 Nov;56(11):1697-707.