G12 抗体 - 常见问题

G12 抗体能识别什么肽序列？

G12 抗体是针对诱发乳糜泻的α-gliadin 蛋白的高免疫毒性 33-mer肽（Morón 等人，2008 年）而制备的。更具体地说，33-mer 的识别区域是六聚体表位 QPQLPY。这一识别序列在麦胶蛋白 33-mer肽中重复了三次。G12 抗体可识别来自小麦、大麦、黑麦以及某些燕麦品种的免疫毒性谷蛋白（Morón 等人，2008 年）。G12 抗体还能与其他有毒脯氨酸中的表位发生反应，如 QPQLPF、QPQLPL、QPQQPY、QPQQPF（Morón 等人，2008 年；Real 等人，2014 年）。

G12 抗体只对α-gliadin 的 33-mer 有反应吗？

不是的。G12 抗体可对其他胶蛋白（Ω、α、γ 和 beta）以及谷蛋白中的类似序列产生反应。G12 的识别特征已基本确定。(Morón等人，2008a；Morón等人，2008b；Real等人，2014）。在小麦、大麦和黑麦的免疫原性肽中还发现了其他可能与 G12 产生反应的肽：qpqlpy, qpqqpy, qpqqpf, qpqlpf, qpqlpl, qpelpy。

G12 能检测啤酒和其他水解材料中的麸质吗？

在啤酒等水解材料中，由于发酵后产生的肽群的多样性，乳糜泻患者的反应性肽的相对比例可能会有所不同。在几年前发表的一篇文章（Comino 等人，2012 年）中，用两种不同的方法（竞争性酶联免疫吸附法和侧流免疫测定法）分析了多种基于 G12 抗体的啤酒，结果相似。后来（Real 等人，2014 年），一种被合法标注为无麸质啤酒（通过竞争性 ELISA R5 检测不到麸质）被证明含有通过 ELISA G12 和质谱测定的麸质肽，质谱确定了对乳糜泻患者有免疫毒性的肽。将乳糜泻患者的免疫系统细胞暴露于这些肽并测量其反应就能证明这一点。最近的一项研究（Picariello 等人，2015 年）分析了 WeissbIer（小麦啤酒）样本，检测到了 G12 的免疫毒性表位。他们以乳糜泻患者的血清作为抗糖蛋白抗体的来源对这些啤酒进行了分析，证实小麦啤酒中含有与乳糜泻患者血清具有反应性的肽。

已知有 1000 多种麸质肽具有免疫原性。G12 能识别所有这些肽吗？

用一种抗体检测所有这些肽几乎是不可能的。然而，最近的一项研究（Moreno 等人，2016 年）显示，免疫原性最强的多肽（占乳糜泻 T 细胞免疫反应的 80-95% ）与 G12 发生了反应。相比之下，广泛用于检测麸质的 R5 抗体只能识别大麦啤酒中约 25% 的免疫原性肽。G12 反应性与 T 细胞免疫原性之间的相关性已在几种难以分析的食品（如纯燕麦品种或大麦品种）中进行了大量研究（Comino 等人，2011 年；Comino 等人，2012 年）。

燕麦对乳糜泻患者安全吗？燕麦真的不含麸质吗？

燕麦经常受到交叉污染（在田间和/或生产过程中）。然而，即使燕麦经过精心种植和加工，也并不意味着燕麦就一定是无麸质食品。2011 年的一项研究（Comino 等人，2011 年）表明，并非所有燕麦的麸质免疫原肽含量都相同。所有品种的燕麦都含有麸质蛋白，但每种燕麦的序列和结构都不同，只有其中一些品种会对乳糜泻患者造成危害。将燕麦品种中的麸质暴露于乳糜泻患者的细胞中，细胞会做出适当的反应；它们只对可能具有免疫毒性的燕麦品种产生反应。因此，G12 抗体是任何使用无麸质燕麦的公司的最佳选择。其他研究（Real 等人，2012 年；Comino 等人，2016 年；Silano 等人，2013 年）进一步描述了这些燕麦的差异及其免疫原性。无论如何，小麦麸质对 G12 的反应性总是比反应性最强的燕麦品种高出至少 40 倍。也许只有最敏感的乳糜泻患者才会受到反应性最强的燕麦品种的影响。未来的研究将明确燕麦中的麸质免疫原肽影响乳糜泻患者健康的阈值水平。

乳糜泻患者正在遵循无麸质饮食。有没有简单的方法知道他们的做法是否正确？

直到最近，评估是否坚持无麸质饮食的唯一方法是活组织检查，这种检查昂贵、具有侵入性且令人厌恶；或者是血清学测试，根据多项研究，这种测试不够准确（Kaukinen 等人，2002 年；Tursi 等人，2003 年；Moreno 等人，2015 年；Comino 等人，2016 年），而且经常会导致假阳性或假阴性。当麸质蛋白被摄入并到达胃肠道时，它会被分解成更小的片段，称为肽，并最终分解成氨基酸。其中一些肽（如 33-mer）对这种消化具有抵抗力，并保持完整。它们会通过粘膜屏障，在乳糜泻患者中引发乳糜泻反应。这些肽随后会通过尿液和粪便排出体外，在这两种样本中检测到它们是摄入麸质的直接证据。最近一项涉及 188 名乳糜泻患者的研究表明，约 40% 的患者粪便中可检测到麸质肽。这项研究使用了 Hygiena 公司的 G12 抗体来检测麸质肽。

• "燕麦潜在免疫原性的多样性：选择对乳糜泻无毒性的燕麦品种的依据"。Comino I, Real A, de Lorenzo L, Cornell H, López-Casado MÁ, Barro F, Lorite P, Torres MI, CebollaA, Sousa C.Gut2011 Jul; 60(7):915-22.
• "从对乳糜泻毒性不同的燕麦品种中分离出的谷蛋白的分子和免疫学特征》。Real A, Comino I, de Lorenzo L, Merchán F, Gil-Humanes J, Giménez MJ, López-Casado MÁ, Torres MI, Cebolla Á, Sousa C, Barro F, Pistón F.PLoS One2012; 7(12):e48365.
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• "使用针对主要免疫原性小麦肽的单克隆抗体灵敏检测对乳糜泻患者有毒的谷物成分》。Morón B, Cebolla A, Manyani H, Alvarez-Maqueda M, Megías M, Thomas Mdel C, López MC, Sousa C.Food Nutr Res.2008 Feb;87(2):405-14.
• "乳糜泻患者食物毒性评估：主要免疫原性麸质肽单克隆抗体的特征》。Morón B, Bethune MT, Comino I, Manyani H, Ferragud M, López MC, Cebolla A, Khosla C, Sousa C.PLoS One.DOI: 10.1371.
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