Anticuerpo G12 - Preguntas frecuentes

¿Qué secuencia peptídica reconoce el anticuerpo G12?

El anticuerpo G12 fue criado contra el péptido altamente inmunotóxico 33-mer de la proteína α-gliadina que induce la enfermedad celíaca (Morón et al., 2008). Más concretamente, la región de reconocimiento dentro del 33-mer es el epítopo hexamérico QPQLPY. Esta secuencia de reconocimiento se repite tres veces dentro del péptido 33-mer de la gliadina. El anticuerpo G12 reconoce las prolaminas inmunotóxicas del trigo, la cebada, el centeno y también de algunas variedades de avena (Morón et al., 2008). El anticuerpo G12 también es capaz de reaccionar a otros epítopos que se encuentran en otras prolaminas tóxicas como QPQLPF, QPQLPL, QPQQPY, QPQQPF (Morón et al. 2008; y Real et al. 2014).

¿El anticuerpo G12 es reactivo sólo al 33-mer de la α-gliadina?

No, no lo es. El anticuerpo G12 puede reaccionar a secuencias similares presentes en otras gliadinas (omega, alfa, gamma y beta) y también en las gluteninas. El perfil de reconocimiento del G12 ha sido ampliamente caracterizado. (Morón et al., 2008a, Morón et al., 2008b, Real et al., 2014). Existen otros péptidos que podrían ser reactivos al G12 y que se encuentran en los péptidos inmunogénicos del trigo, la cebada y el centeno: QPQLPY, QPQQPY, QPQQPF, QPQLPF, QPQLPL, QPELPY.

¿Es capaz la G12 de detectar el gluten en cervezas y otros materiales hidrolizados?

En materiales hidrolizados como las cervezas, la proporción relativa de péptidos reactivos para los pacientes celíacos puede diferir, debido a la diversidad de las poblaciones peptídicas resultantes tras la fermentación. En una publicación de hace unos años (Comino et al., 2012), se analizó una amplia variedad de cervezas con dos métodos diferentes basados en el anticuerpo G12 (ELISA competitivo e inmunoensayo de flujo lateral) con resultados similares. Posteriormente (Real et al., 2014) se demostró que una cerveza legalmente etiquetada como sin gluten (nivel indetectable de gluten por ELISA Competitivo R5) contenía péptidos de gluten determinados por ELISA G12 y por espectrometría de masas, que identificaron péptidos inmunotóxicos para los pacientes celíacos. Esto se demostró exponiendo las células del sistema inmunitario de los pacientes celíacos a estos péptidos y midiendo su respuesta. Un estudio más reciente (Picariello et al., 2015) analizó muestras de WeissbIer (cerveza de trigo) y detectó epítopos inmunotóxicos con G12. Analizaron estas cervezas con sueros de pacientes celíacos como fuente de anticuerpos antigliadina, confirmando que la cerveza de trigo contenía péptidos con reactividad con sueros de pacientes celíacos.

Existen más de 1000 péptidos del gluten conocidos como inmunógenos. ¿Reconoce el G12 todos ellos?

Detectar todos estos péptidos con un solo anticuerpo es casi imposible. Sin embargo, un estudio reciente (Moreno et al., 2016) ha demostrado que los péptidos más inmunogénicos (responsables del 80-95% de la inmunorreactividad de las células T celíacas) reaccionaron al G12. Por el contrario, un anticuerpo ampliamente utilizado en la detección del gluten, el R5, solo reconoció alrededor del 25% de estos péptidos inmunogénicos de una cerveza de cebada. La correlación entre la reactividad del G12 y la inmunogenicidad de las células T se ha estudiado ampliamente en varios alimentos difíciles de analizar, como las variedades puras de avena o las variedades de cebada (Comino et al., 2011, Comino et al., 2012).

¿Es segura la avena para los celíacos? ¿Están realmente libres de gluten?

La avena suele estar sujeta a contaminación cruzada (en el campo y/o durante el proceso de fabricación). Sin embargo, aunque la avena se haya cultivado y procesado con cuidado, esto no significa que siempre se considere un alimento sin gluten. Un estudio del año 2011 (Comino et al., 2011) demostró que no todas las avenas son iguales en contenido de péptidos inmunogénicos del gluten. Todas las variedades de avena contienen avenina, pero cada una con una secuencia y estructura diferentes, y sólo algunas de estas variedades podrían suponer un riesgo para los pacientes celíacos. El gluten de las variedades de avena se expuso a células de pacientes celíacos, y las células respondieron adecuadamente; sólo reaccionaron a las variedades de avena potencialmente inmunotóxicas. Por lo tanto, el anticuerpo G12 es la mejor opción para cualquier empresa que trabaje con avena sin gluten. Otros estudios (Real et al., 2012; Comino et al,.2016, Silano et al., 2013) han caracterizado aún más las diferencias de estas avenas y su inmunogenicidad. En cualquier caso, el gluten de trigo siempre contenía al menos 40 veces más reactividad al G12 que la variedad de avena más reactiva. Tal vez, sólo los pacientes celíacos más sensibles puedan verse afectados por las variedades de avena más reactivas. Futuros estudios aclararán el nivel umbral de avena con péptidos inmunogénicos del gluten para repercutir en la salud del celíaco.

Un paciente celíaco está siguiendo una dieta sin gluten. ¿Existe una forma fácil de saber si lo están haciendo correctamente?

Hasta hace poco, la única forma de evaluar el cumplimiento de una dieta sin gluten era una biopsia, que es cara, invasiva y desagradable, o una prueba serológica, que, según varios estudios, no es lo suficientemente precisa (Kaukinen et al., 2002; Tursi et al., 2003; Moreno et al., 2015; Comino et al., 2016) y a menudo puede dar falsos positivos o negativos. Cuando el gluten se ingiere y llega al tracto gastrointestinal se descompone en trozos más pequeños, llamados péptidos y, en última instancia, en aminoácidos. Algunos de estos péptidos (como el 33-mer) son resistentes a esta digestión y permanecen intactos. Atraviesan la barrera mucosa y, en los pacientes celíacos, desencadenan la respuesta celíaca. Estos péptidos se excretarán entonces tanto en la orina como en las heces y su detección en estos dos tipos de muestras es una prueba directa de la ingestión de gluten. Un estudio reciente en el que participaron 188 pacientes celíacos demostró que alrededor del 40% presentaba niveles detectables de péptidos de gluten en las heces. Este estudio utilizó el anticuerpo G12 de Hygiena para detectar los péptidos de gluten.

• "Diversidad en la inmunogenicidad potencial de la avena: base para la selección de variedades de avena sin toxicidad en la enfermedad celíaca". Comino I, Real A, de Lorenzo L, Cornell H, López-Casado MÁ, Barro F, Lorite P, Torres MI, CebollaA, Sousa C. Gut 2011 Jul;60(7):915-22.
• "Caracterización molecular e inmunológica de proteínas de gluten aisladas de cultivares de avena que difieren en toxicidad para la enfermedad celíaca". Real A, Comino I, de Lorenzo L, Merchán F, Gil-Humanes J, Giménez MJ, López-Casado MÁ, Torres MI, Cebolla Á, Sousa C, Barro F, Pistón F. PLoS One 2012;7(12):e48365.
• "Identificación y caracterización molecular de péptidos de avena implicados en la respuesta inmune celíaca". Comino I, Bernardo D, Bancel E, de Lourdes Moreno M, Sánchez B, Barro F, Šuligoj T, Ciclitira PJ,Cebolla Á, Knight SC, Branlard G, Sousa C. Food Nutr Res. 2016 Feb 5;60:30324.
• "Detección sensible de fracciones de cereales tóxicas para pacientes celíacos mediante el uso de anticuerpos monoclonales frente a un péptido inmunógeno principal del trigo". Morón B, Cebolla A, Manyani H, Alvarez-Maqueda M, Megías M, Thomas Mdel C, López MC, Sousa C. Food Nutr Res. 2008 Feb;87(2):405-14.
• "Hacia la evaluación de la toxicidad alimentaria en pacientes celíacos: caracterización de anticuerpos monoclonales frente a un péptido inmunógeno principal del gluten". Morón B, Bethune MT, Comino I, Manyani H, Ferragud M, López MC, Cebolla A, Khosla C, Sousa C. PLoS One. 2008 mayo 28;3(5):e2294. doi: 10.1371.
• "Diferencias significativas en la inmunotoxicidad celíaca de las variedades de cebada". Comino I, Real A, Gil-Humanes J, Pistón F, de Lorenzo L, Moreno Mde L, López-Casado MÁ, Lorite P, Cebolla A, Torres MI, Barro F, Sousa C. Mol Nutr Food Res. 2012 Nov;56(11):1697-707.