G12 Antikörper - Häufig gestellte Fragen

Welche Peptidsequenz erkennt der G12-Antikörper?

Der G12-Antikörper wurde gegen das hochgradig immuntoxische 33-mer Peptid des α-Gliadin-Proteins gezüchtet, das Zöliakie auslöst (Morón et al., 2008). Genauer gesagt handelt es sich bei der Erkennungsregion innerhalb des 33-mer um das hexamere Epitop QPQLPY. Diese Erkennungssequenz wird innerhalb des 33-mer Peptids von Gliadin dreimal wiederholt. Der G12-Antikörper erkennt immunotoxische Prolamine aus Weizen, Gerste, Roggen und auch aus einigen Hafersorten (Morón et al., 2008). Der G12-Antikörper ist auch in der Lage, mit anderen Epitopen zu reagieren, die in anderen toxischen Prolaminen wie QPQLPF, QPQLPL, QPQQPY, QPQQPF vorkommen (Morón et al. 2008; und Real et al. 2014).

Reagiert der G12-Antikörper nur auf das 33-mer des α-Gliadins?

Nein, das ist er nicht. Der G12-Antikörper kann auf ähnliche Sequenzen reagieren, die in anderen Gliadinen (Omega, Alpha, Gamma und Beta) und auch in Gluteninen vorkommen. Das Erkennungsprofil von G12 ist weitgehend charakterisiert worden. (Morón et al., 2008a, Morón et al., 2008b, Real et al., 2014). Es gibt weitere Peptide, die mit G12 reaktiv sein könnten und die in immunogenen Peptiden von Weizen, Gerste und Roggen vorkommen: QPQLPY, QPQQPY, QPQQPF, QPQLPF, QPQLPL, QPELPY.

Ist der G12 in der Lage, Gluten in Bieren und anderen hydrolysierten Materialien nachzuweisen?

In hydrolysierten Materialien wie Bier kann der relative Anteil reaktiver Peptide für Zöliakie-Patienten unterschiedlich sein, da die Peptidpopulationen nach der Fermentierung unterschiedlich sind. In einer Veröffentlichung vor einigen Jahren (Comino et al., 2012) wurde eine Vielzahl von Bieren mit zwei verschiedenen Methoden auf der Grundlage des G12-Antikörpers (Competitive ELISA und Lateral Flow Immunoassay) mit ähnlichen Ergebnissen analysiert. Später (Real et al., 2014) wurde gezeigt, dass ein Bier, das legal als glutenfrei gekennzeichnet war (nicht nachweisbare Glutenkonzentration im kompetitiven ELISA R5), Glutenpeptide enthielt, die mit dem ELISA G12 und der Massenspektrometrie bestimmt wurden und immunotoxische Peptide für Zöliakiepatienten identifizierten. Dies wurde nachgewiesen, indem die Zellen des Immunsystems von Zöliakiepatienten diesen Peptiden ausgesetzt und ihre Reaktion gemessen wurde. In einer neueren Studie (Picariello et al., 2015) wurden Proben von Weißbier analysiert und immunotoxische Epitope mit G12 nachgewiesen. Sie analysierten diese Biere mit Seren von Zöliakiepatienten als Quelle für Anti-Gliadin-Antikörper und bestätigten, dass das Weizenbier Peptide enthielt, die mit Seren von Zöliakiepatienten reaktiv waren.

Es gibt mehr als 1000 Glutenpeptide, die als immunogen bekannt sind. Erkennt das G12 alle von ihnen?

Es ist fast unmöglich, all diese Peptide mit einem einzigen Antikörper zu erkennen. Eine aktuelle Studie (Moreno et al., 2016) hat jedoch gezeigt, dass die immunogensten Peptide (verantwortlich für 80-95% der Immunreaktivität von Zöliakie-T-Zellen) auf G12 reagierten. Im Gegensatz dazu erkannte ein weit verbreiteter Antikörper zum Nachweis von Gluten, R5, nur etwa 25% dieser immunogenen Peptide eines Gerstenbiers. Die Korrelation zwischen der G12-Reaktivität und der Immunogenität von T-Zellen wurde bei mehreren schwer zu analysierenden Lebensmitteln wie reinen Hafersorten oder Gerstensorten weitgehend untersucht (Comino et al., 2011, Comino et al., 2012).

Ist Hafer für Zöliakiepatienten sicher? Sind sie wirklich glutenfrei?

Hafer ist häufig Gegenstand von Kreuzkontaminationen (auf dem Feld und/oder während des Herstellungsprozesses). Doch selbst wenn der Hafer sorgfältig angebaut und verarbeitet wurde, bedeutet das nicht, dass er immer als glutenfreies Lebensmittel gilt. Eine Studie aus dem Jahr 2011 (Comino et al., 2011) zeigte, dass der Gehalt an glutenimmunogenen Peptiden nicht bei allen Hafersorten gleich ist. Alle Hafersorten enthalten Avenin, aber jede mit einer anderen Sequenz und Struktur, und nur einige dieser Sorten könnten ein Risiko für Zöliakiepatienten darstellen. Das Gluten aus den Hafersorten wurde Zellen von Zöliakiepatienten ausgesetzt, und die Zellen reagierten angemessen; sie reagierten nur auf die potenziell immunotoxischen Hafersorten. Daher ist der G12-Antikörper die beste Wahl für jedes Unternehmen, das mit glutenfreiem Hafer arbeitet. Andere Studien (Real et al., 2012; Comino et al,.2016, Silano et al., 2013) haben die Unterschiede dieser Hafersorten und ihre Immunogenität weiter charakterisiert. In jedem Fall wies das Weizengluten immer eine mindestens 40-fach höhere Reaktivität gegenüber G12 auf als die reaktivste Hafersorte. Möglicherweise können nur die empfindlichsten Zöliakiepatienten von den reaktivsten Hafersorten betroffen sein. Zukünftige Studien werden klären, ab welchem Schwellenwert Hafer mit glutenimmunogenen Peptiden Auswirkungen auf die Zöliakiegesundheit hat.

Ein Zöliakie-Patient hält eine glutenfreie Diät ein. Gibt es eine einfache Methode, um festzustellen, ob er dies richtig tut?

Bis vor kurzem bestand die einzige Möglichkeit, die Einhaltung einer glutenfreien Diät zu beurteilen, in einer Biopsie, die teuer, invasiv und ekelerregend ist, oder in einem serologischen Test, der mehreren Studien zufolge nicht genau genug ist (Kaukinen et al., 2002; Tursi et al., 2003; Moreno et al., 2015; Comino et al., 2016) und oft zu falsch positiven oder negativen Ergebnissen führen kann. Wenn Gluten aufgenommen wird und den Magen-Darm-Trakt erreicht, wird es in kleinere Teile, die sogenannten Peptide, und schließlich in Aminosäuren zerlegt. Einige dieser Peptide (wie das 33-mer) sind resistent gegen diese Verdauung und bleiben intakt. Sie passieren die Schleimhautbarriere und lösen bei Zöliakiepatienten die Zöliakie-Reaktion aus. Diese Peptide werden dann sowohl im Urin als auch im Stuhl ausgeschieden und ihr Nachweis in diesen beiden Probenarten ist ein direkter Beweis für die Aufnahme von Gluten. Eine kürzlich durchgeführte Studie, an der 188 Zöliakiepatienten teilnahmen, zeigte, dass etwa 40 % von ihnen nachweisbare Mengen an Glutenpeptiden in ihren Fäkalien hatten. In dieser Studie wurde der G12-Antikörper von Hygiena zum Nachweis von Glutenpeptiden verwendet.

• "Vielfalt in der potenziellen Immunogenität von Hafer: Grundlage für die Auswahl von Hafersorten, die bei Zöliakie nicht toxisch sind". Comino I, Real A, de Lorenzo L, Cornell H, López-Casado MÁ, Barro F, Lorite P, Torres MI, CebollaA, Sousa C. Gut 2011 Jul;60(7):915-22.
• "Molekulare und immunologische Charakterisierung von Glutenproteinen, die aus Hafersorten isoliert wurden, die sich in ihrer Toxizität für Zöliakie unterscheiden". Real A, Comino I, de Lorenzo L, Merchán F, Gil-Humanes J, Giménez MJ, López-Casado MÁ, Torres MI, Cebolla Á, Sousa C, Barro F, Pistón F. PLoS One 2012;7(12):e48365.
• "Identifizierung und molekulare Charakterisierung von Haferpeptiden, die bei der Immunantwort auf Zöliakie eine Rolle spielen". Comino I, Bernardo D, Bancel E, de Lourdes Moreno M, Sánchez B, Barro F, Šuligoj T, Ciclitira PJ,Cebolla Á, Knight SC, Branlard G, Sousa C. Food Nutr Res. 2016 Feb 5;60:30324.
• "Empfindlicher Nachweis von Getreidefraktionen, die für Zöliakie-Patienten toxisch sind, mit Hilfe von monoklonalen Antikörpern gegen ein wichtiges immunogenes Weizenpeptid". Morón B, Cebolla A, Manyani H, Alvarez-Maqueda M, Megías M, Thomas Mdel C, López MC, Sousa C. Food Nutr Res. 2008 Feb;87(2):405-14.
• "Toward the assessment of food toxicity for celiac patients: characterization of monoclonal antibodies to a main immunogenic gluten peptide". Morón B, Bethune MT, Comino I, Manyani H, Ferragud M, López MC, Cebolla A, Khosla C, Sousa C. PLoS One. 2008 May 28;3(5):e2294. doi: 10.1371.
• "Signifikante Unterschiede in der Zöliakie-Immunotoxizität von Gerstensorten". Comino I, Real A, Gil-Humanes J, Pistón F, de Lorenzo L, Moreno Mde L, López-Casado MÁ, Lorite P, Cebolla A, Torres MI, Barro F, Sousa C. Mol Nutr Food Res. 2012 Nov;56(11):1697-707.