ความปลอดภัยทางอาหาร
วิธีการใหม่ที่ได้รับการตรวจสอบแล้วสำหรับการตรวจหาเชื้อ E. coli O157:H7 ในเนื้อวัวบด
กรมความปลอดภัยอาหารและการตรวจสอบของกระทรวงเกษตรสหรัฐอเมริกา (USDA FSIS) ทำการเก็บรวบรวมและวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์เนื้อวัวดิบเพื่อหาเชื้อShiga toxin-producing Escherichia coli(STEC) และ Salmonella วิธีการในปัจจุบันอาจต้องใช้แรงงานมากและส่งผลให้เกิดการสูญเสียผลิตภัณฑ์ โดยทั่วไป ตัวอย่างจะถูกเก็บรวบรวมโดยการตัด N60 และทำการวิเคราะห์ร่วมกันเพื่อหาการมีอยู่ของเชื้อทั้งสองชนิด อุตสาหกรรมเนื้อวัวใช้เทคนิคการเก็บตัวอย่างเดียวกันนี้เป็นประจำ
วิธีการ N60 คืออะไร?
วิธีนี้ต้องสุ่มตัวอย่างเนื้อวัวที่ตัดแต่งจากแต่ละล็อตการผลิต โดยต้องเก็บตัวอย่างทั้งหมด 60 ชิ้นจากแต่ละล็อต โดยเก็บตัวอย่างอย่างปลอดเชื้อโดยการหั่นเป็นเส้นบางๆ จากผิวด้านนอกของชิ้นเนื้อที่ตัดแต่ง จากนั้นใช้มีดกรีดแต่ละเส้นและใส่ลงในถุงตัวอย่าง เมื่อเตรียมเส้นทั้งหมดแล้ว ถุงควรมีน้ำหนักประมาณ 325 กรัม จากนั้นนำถุงตัวอย่างส่งไปยังห้องปฏิบัติการเพื่อทำการทดสอบกระบวนการนี้ต้องใช้แรงงานมาก มีปัญหาด้านความปลอดภัยต่อพนักงาน และเพิ่มโอกาสในการปนเปื้อนข้าม (เนื่องจากอาจต้องเก็บตัวอย่างจากหลายชั้นกั้น) หลังจากนั้นจะมีการทดสอบในห้องปฏิบัติการ และหากได้ผลบวกสำหรับE. coliจะมีการทดสอบเพิ่มเติมเพื่อยืนยันว่าตัวอย่างนั้นเป็นบวกจริง การทดสอบยืนยันโดยทั่วไปใช้เวลา 3 ถึง 4 วัน
หากกระบวนการนี้สามารถทำให้ง่ายขึ้นได้ล่ะ?
เราเชื่อว่ามันสามารถทำได้อย่างแน่นอน วิธีการสุ่มตัวอย่างแบบใหม่ได้ถูกพัฒนาขึ้นเมื่อไม่นานมานี้ โดยใช้ไม้กวาดตัวอย่างแบบใช้มือ (MSD) แทนการตัดตัวอย่างเนื้อจริงเพื่อนำมาทดสอบ ไม้กวาดตัวอย่าง MSD นี้ถูกออกแบบมาเพื่อเก็บเชื้อโรคจากผิวหน้าของเนื้อทั้งหมดบนผ้าเมทริกซ์ ไม้กวาดตัวอย่างนี้มอบวิธีการสุ่มตัวอย่างที่ง่ายขึ้นสำหรับเนื้อวัวที่ตัดแต่ง ไม่ทำลายตัวอย่าง และช่วยประหยัดแรงงาน (ทั้งเวลาและความปลอดภัย)ไม้กวาดชนิดนี้ให้แนวทางการเก็บตัวอย่างที่ง่ายและไม่ทำลายตัวอย่าง. เมื่อใช้ร่วมกับเทคนิคการรวมตัวอย่างหลังการเพิ่มปริมาณตัวอย่าง (post-enrichment pooling) การเก็บตัวอย่างจากผิวผิวหน้าโดยใช้ไม้กวาด MSD มีศักยภาพที่จะให้ผลลัพธ์ที่รวดเร็วและประหยัดค่าใช้จ่ายเมื่อทำการทดสอบด้วย PCR และช่วยลดการสูญเสียของผลิตภัณฑ์.
เราตรวจสอบความถูกต้องของมันอย่างไร?
ใช้ไม้กวาดMicroTally™MSD ในการเก็บตัวอย่างเนื้อวัวดิบ จากนั้นจึงเติมเชื้อE. coliO157:H7 และ Salmonella Typhimurium ในปริมาณสูงหรือต่ำกลุ่มควบคุมที่ไม่ได้รับเชื้อได้รับการวิเคราะห์ควบคู่กันด้วย โดยใช้สำลีเช็ดเก็บตัวอย่างแล้วนำไปผสมให้เข้ากันกับอาหารเลี้ยงเชื้อ MP สูตรเฉพาะ ปริมาณ 200 มิลลิลิตร ที่อุ่นไว้ล่วงหน้า (42°C) จากนั้นนำไปบ่มที่อุณหภูมิ 42°C เป็นเวลา 8-24 ชั่วโมง ตัวอย่างที่ได้นำไปทดสอบโดย Real-Time PCR โดยใช้ระบบ BAX®และยืนยันตามขั้นตอนในวิธีการของ USDA FSIS MLG 5C.00 (STEC) และ 4.10 (Salmonella)
สรุป:
ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าวิธีนี้ให้ผลลัพธ์ที่แม่นยำสำหรับการตรวจหาทั้งE. coliและ Salmonella Typhimurium ที่ 8 ชั่วโมง เทียบเท่ากับวิธีอ้างอิงของ USDA FSIS ความไวและความจำเพาะอยู่ที่ 100% อ้างอิง:
- สภาความปลอดภัยอาหารอุตสาหกรรมเนื้อวัว (BIFSCO) มีนาคม 2020 เอกสารแนวทางสำหรับการจัดกลุ่มและการสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์เนื้อวัวเพื่อการวิเคราะห์เชื้อโรคhttps://www.bifsco.org/Media/BIFSCO/Docs/lotting_and_sampling_of_beef_products_for_pathogens_analysis_update_april_-2019.pdf
