Um método novo e validado para detectar E. coli O157:H7 em carne bovina

O Serviço de Inspeção e Segurança Alimentar do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos (USDA FSIS) coleta e analisa produtos de carne bovina crua para Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) e Salmonella. Os métodos atuais podem ser trabalhosos e resultar em perda de produto. Normalmente, uma amostra é coletada por excisão N60 e é analisada em conjunto quanto à presença de ambos os patógenos. O setor de carne bovina usa essas mesmas técnicas de amostragem rotineiramente.

O que é o método N60?

Esse método requer amostragem aleatória de aparas de carne bovina por lote de produção. Um total de 60 peças de cada lote deve ser coletado assepticamente, cortando tiras finas da superfície externa das peças de corte. Cada tira é então cortada com uma faca e colocada em um saco de amostragem. Quando todas as tiras forem preparadas, o saco deverá pesar aproximadamente 325g. Os sacos são então enviados ao laboratório para testes. Esse processo é trabalhoso, apresenta problemas de segurança para os funcionários e aumenta as chances de contaminação cruzada (já que as amostras podem precisar ser coletadas de várias barreiras). Em seguida, são realizados os testes laboratoriais e, se o resultado for positivo para E. coli, são realizados outros testes para confirmar se a amostra é realmente positiva. Os testes de confirmação geralmente levam de 3 a 4 dias.

E se esse processo pudesse ser simplificado?

Acreditamos que sim. Recentemente, foi desenvolvida uma nova metodologia de amostragem que utiliza um swab com dispositivo de amostragem manual (MSD) em vez de retirar porções reais de carne para serem testadas. O swab MSD foi projetado para capturar patógenos da superfície superior de todo o lote em uma matriz de tecido. Esse swab oferece uma abordagem de amostragem simplificada para cortes de carne bovina que não é destrutiva e proporciona economia de mão de obra (tanto em termos de tempo quanto de segurança). Esse swab fornece uma abordagem de amostragem simplificada que não é destrutiva. Em combinação com o pooling pós-enriquecimento, a amostragem de superfície usando o swab MSD tem o potencial de produzir resultados rápidos e econômicos quando examinados com PCR e de reduzir o desperdício de produtos.

Como fizemos a validação?

Usando os swabs ^{MicroTally™} MSD, a guarnição de carne bovina crua foi esfregada e, em seguida, adicionada com quantidades de alto ou baixo nível de E. coli O157:H7 e Salmonella Typhimurium. Controles não inoculados também foram analisados em paralelo. Os swabs foram homogeneizados com 200 mL de meio MP patenteado pré-aquecido (42°C) e incubados a 42°C por 8-24 horas. As amostras foram testadas por PCR em tempo real usando o BAX^® System e confirmadas de acordo com os procedimentos dos métodos 5C.00 (STEC) e 4.10 (Salmonella) do USDA FSIS MLG.

Conclusões:

Os resultados indicaram que esse método forneceu resultados precisos para a detecção de E. coli e Salmonella Typhimurium em 8 horas, equivalente ao método de referência do USDA FSIS. A sensibilidade e a especificidade foram de 100%. Referências:

1. Conselho de Segurança Alimentar do Setor de Carne Bovina (BIFSCO), março de 2020. Documento de orientação para loteamento e amostragem de produtos de carne bovina para análise de patógenos. https://www.bifsco.org/Media/BIFSCO/Docs/lotting_and_sampling_of_beef_products_for_pathogens_analysis_update_april_-2019.pdf