利用定制的 DNA/RNA 提取技术进行实时 PCR 检测，实现可靠的食品安全检测
DNA/RNA 提取是实时 PCR 样品制备的关键步骤，可对各种样品中的遗传物质进行精确鉴定和定量。这项技术是食品安全和环境监测检测所需的分子步骤中不可或缺的一部分，可准确检测病原体、腐败变质物、动物物种、过敏原和转基因生物。通过确保可靠的结果，可靠的 DNA/RNA 提取方法在保护消费者健康和维护产品完整性方面发挥着至关重要的作用。
什么是 DNA/RNA 提取？
DNA/RNA 提取是分子生物学中的一个基本过程，它涉及破开细胞以释放其核酸--DNA 或 RNA。这一过程首先通过物理或化学方法破坏细胞膜，使细胞内的遗传物质与细胞的其他成分分离。然后分离提取的核酸，去除可能干扰进一步分析的任何蛋白质、脂质或其他杂质，确保更高的纯度。
在实时 PCR 中，DNA/RNA 提取是样品制备的关键步骤。对于食品安全和环境检测，这一过程可确保相关遗传物质（无论是来自病原体、过敏原、转基因生物还是动物物种）从细胞中释放出来，为进一步处理做好准备。提取 DNA 或 RNA 后，可通过 PCR 进行扩增和分析，从而实现对潜在污染物的精确检测和定量。这一步骤对于确保食品安全和符合监管标准至关重要。
DNA 提取概述
本视频由 Ivy PDC 制作
DNA/RNA 提取是如何进行的？
作为重要的准备步骤，适当的样品均质化和富集可确保测试材料得到充分准备和浓缩，从而实现有效的 DNA/RNA 提取。
- 裂解：DNA/RNA 提取过程从裂解开始（DNA 提取时进行细胞裂解，RNA 提取时进行病毒颗粒裂解），这是一个关键步骤，将样品中的细胞或颗粒打碎以释放核酸。这可以通过多种方法实现，包括酶处理（使用蛋白酶 K 等酶）、机械破坏（如打珠或均质化）或化学制剂（如洗涤剂或碱溶液）。裂解的目的是有效破坏细胞膜、细胞壁或病毒颗粒，使细胞内的核酸（DNA 或 RNA）释放到溶液中。这一步骤对于获取下游分析所需的遗传物质至关重要。
- 可选步骤纯化提取物：裂解后的提取物通常含有核酸、蛋白质、脂质和其他细胞碎片。纯化提取物是一个可选但重要的步骤，可将 DNA 或 RNA 从这些杂质中分离出来，确保核酸纯度高，适合进行精确的分子检测。纯化可采用多种方法，如将核酸与固体基质（如硅胶柱）结合、用酒精沉淀或使用磁珠。然后对纯化提取物进行洗涤以去除任何残留杂质，最后用缓冲液或水进行洗脱，留下干净的 DNA 或 RNA 样品以备进一步分析。这一步骤对于从真核细胞等复杂提取物中进行下游实时 PCR 反应尤为重要，因为这些提取物需要高纯度的核酸才能得到精确可靠的结果。
DNA 提取实验室方法
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定制 DNA/RNA 提取用于实时 PCR 检测的优势
定制的 DNA/RNA 提取方法在使用实时 PCR 检测污染物和确保食品与环境样品安全方面具有多项关键优势。
- 针对不同样品类型进行优化： 食品和环境样品的成分千差万别，需要专门的提取方法才能有效处理不同的基质。量身定制的 DNA/RNA 提取方法可有效处理各种类型的样品，确保您无论是检测复杂的食品还是环境表面，都能可靠地提取出准确 PCR 分析所需的核酸。
- 提高效率和一致性： 定制提取解决方案可简化您的工作流程，减少出错的可能性，确保多种检测和样品类型结果的一致性。效率的提高确保了检测流程的可靠性和可重复性，这对于保持较高的安全和质量标准至关重要。
- 与自动化系统兼容： 随着检测实验室越来越多地采用自动化技术来提高通量并减少人工劳动，定制的 DNA/RNA 提取方法可与自动化 PCR 系统无缝集成。这种兼容性可实现高通量处理，减少样品制备所需的时间和精力，同时保持结果的准确性和可靠性。
适合检测工作流程的 DNA/RNA 提取方法
选择合适的 DNA/RNA 提取方法对于满足检测流程的特定需求至关重要。客户的需求千差万别，因此需要量身定制的解决方案，以提供便利、可靠的结果和自动化的可能性。无论您是要进行常规检测，还是需要一种能无缝集成到自动化工作流程中的方法，正确的提取方法都能确保样品制备的准确性和高效性。
不同的检测基质，如复杂的食品或环境样品，在萃取过程中都会面临巨大的挑战。这些基质的成分差异很大，需要专门的方法才能有效地分解细胞并分离核酸。量身定制的提取解决方案专为处理这些困难的基质而设计，确保即使是最具挑战性的样品也能获得高质量的 DNA 或 RNA，以进行可靠的 PCR 分析。
通过选择正确的提取方法，您可以优化检测流程，减少潜在错误，并确保结果始终准确无误，无论样品类型如何。BAX® System 检测试剂盒集成了裂解方法，可在实时 PCR 运行中直接使用提取物。foodproof® 检测试剂盒提供各种专门的提取步骤，以满足客户的某些需求，如高纯度分离、手动高通量或全自动检测程序。
当高纯度分离非常重要时，如巧克力等可能干扰 PCR 的难分离基质，或当其他 PCR 检测结果不明确时，可将 foodproof 检测试剂盒用作额外的验证步骤。
BAX 系统：集成 DNA 提取功能，实现快速便捷的病原体检测
BAX System 实时 PCR 方案包括一个优化的热诱导裂解病原体细胞壁的步骤，可在 PCR 反应中直接使用提取物。
BAX System PCR 检测：集成 DNA 分离技术
所有用于病原体检测的 BAX System PCR 试剂盒都在方案中集成了裂解步骤。
foodproof DNA/RNA 提取：针对特定客户需求的定制纯化程序
foodproof 产品系列采用模块化方法，用户可以针对食品和环境样品的实时 PCR 检测程序中的每个步骤选择最佳解决方案。与 BAX System 试剂盒不同的是，foodproof 程序将 DNA/RNA 提取与实时 PCR 检测步骤分开，为客户的每一种需求提供专门的解决方案。为了使 foodproof real-time PCR 检测试剂盒不仅能检测微生物，还能检测病毒和过敏原、鉴别动物种类以及筛选和鉴别转基因生物，我们专门设计了多种 foodproof 提取试剂盒：
foodproof StarPrep® 试剂盒：从细菌细胞中定制纯化 DNA
专为从多种类型的样品中有效手动提取 DNA 而设计，包括用于手动高通量提取的专用解决方案（8 条试剂盒）。
foodproof 样品制备套件：从具有挑战性的样品中进行高纯度分离
利用柱式 DNA 纯化技术，用于真核细胞（动物和植物）。还可用于手动提取病毒样本的 RNA。
foodproof 磁性制备试剂盒：自动化程序的高纯度分离
专为使用自动防食品® RoboPrep® 系列工作站进行基于磁珠的 DNA 和 RNA 纯化而设计。
DNA/RNA 提取的主要启示
- 正确的 DNA/RNA 提取是获得可靠的实时 PCR 检测结果的关键准备步骤
- 我们的产品线可为各种基质提供不同的 DNA/RNA 提取方法选择
- 多种经第三方认证和验证的检测方法
BAX® System 产品系列
- 细胞裂解/DNA 分离是 BAX System PCR 检测中的一个综合步骤
- 可用于快速、方便地检测各种基质中的病原体
- 专为定量和定性检测各种食品基质中的病原体而设计
- 经过验证的检测方法可定量检测沙门氏菌、弯曲杆菌、李斯特菌和大肠杆菌等主要病原体
- 与使用 Hygiena® Prep Express 进行的半自动化处理兼容
® 产品系列
- DNA/RNA 提取是一个单独的步骤，可根据客户的具体需求定制额外的提取试剂盒
- foodproof StarPrep 提取试剂盒：用于从细菌（病原体和腐败生物）中提取定制的 DNA，手动样品处理量从低到高不等。
- foodproof 样品制备试剂盒：用于从真核细胞（用于过敏原检测、转基因生物筛选和鉴定、动物鉴定）和 RNA 纯化（用于病毒检测）中进行定制的 DNA 纯化
- foodproof 磁性制备试剂盒：用于使用 RoboPrep® 系列工作站进行半自动和全自动 DNA 纯化
- 当使用 BAX System 试剂盒的检测结果不明确时，可作为额外的验证步骤使用
- 在需要高纯度分离时使用，例如含有 PCR 抑制成分的样本