专家解读：您需要了解的五大量化技巧

欢迎收看由 MDx 全球产品经理 April Englishbey 主讲的第一期 "专家解读 "系列节目。

让我们直接了解量化技术。

"我一直从事定量工作，并在商业上推出了第一款定量方法（或试剂盒）SalQuant™，我也一直参与其中。因此，我想以客户的身份与大家分享一些经验和特性，以及在向供应商咨询定量问题时应该注意的事项。

作为一个在行业量化开发方面拥有丰富实践经验的人，我想与大家分享我们在开始开发任何类型的量化时所考虑的关键要素，以及它是如何为行业工作以最终实现降低消费者风险的目标的"。

技巧 1

"第一是数据的灵活性。对于您希望获取和使用的数据，请考虑一下您到底想知道什么？当你得到 5.7 CFU per/g 的结果时，你究竟如何将其用作决策工具？这就是我们与客户一起进行的一些咨询性探索，以便从根本上了解您需要如何利用额外的信息"。

了解这些问题的答案有助于您根据数据的灵活性和目的来决定需要哪种量化方式。

1. 真正的定量，如 SalQuant，利用确定的培养时间点和软件来确定原始样本中的细菌数量。
2. 限值检测只是在指定时间点出现阳性时进行识别，表明细菌数量大于设定的阈值。有时，这种检测方式也被称为半定量检测，但限值和阈值检测就不那么容易混淆了。

真正了解您正在寻找的数据类型以及如何使用这些数据做出决定非常重要！最后，您使用的方法是否可以灵活地利用单一样品或方案来执行定量或限值测试？

提示 2

"第二个工具是动态矩阵选项。

食品安全不仅仅是最终产品，大多数情况下，这些样品确实是最大的重点。然而，加工和收获前也是管理整个食品安全领域需要关注的一部分。

3 年前，当我们开始这一旅程时，我们首先开发了最终产品的定量方法，并收集了大量数据，但我们仍需要弄清楚为什么在整个过程中采取了所有干预措施后，细菌仍能存活。

如果我们能在动物和食品生产的前端进行清理，我们就有更大的机会在整个过程中清除沙门氏菌并降低风险。这就是为什么我们可以看到各行业和影响者不仅从最终产品中收集数据，而且在整个流程中添加一致的数据点，并真正评估干预措施是否有效。我们还继续向后延伸到农场或收获前的层面，以衡量我们可以在哪些方面影响沙门氏菌的进出量。

寻找方法可靠的供应商，以便在各种基质中发挥作用，甚至是脏样品，如重新悬挂与冷却后漂洗的样品，两者都是漂洗物，但由于 "脏 "的性质，要验证方法是否有效。

并非所有的样品都是一样的，即使它们看起来很相似，因此确保已经进行了验证，对自己查看数据非常重要。

提示 3

"技巧三 "是扩大可枚举范围。

检测方法需要能够达到低端（1 CFU）和高端（10,000 CFU）的定量范围，因为我们需要根据样品类型以及出现细菌繁殖失控的严重故障时的情况灵活处理。

在食品安全计划中，我们知道有时会出现离群值（低或高），与报告负值或大于可数范围相比，该方法需要能够量化，因为这不是一个有用的数据点。

"我喜欢以冲洗液为例，就像我在技巧 2 中提到的那样，流程控制的目的是从脏到干净。能够量化干预前细菌数量较高，干预后仍有阳性但数量很低的情况，知道它仍可检测和量化，对于真正衡量流程和干预措施的有效性非常重要。

真正重要的是要明白，人们对最终产品的期望是最干净，大多数情况下没有病原体。结果不应该是 100 CFU/g 或毫升这样的高水平。根据行业不同，即使是 10 CFU/g 也可能过高。仅定量 100 CFU/g 的低端方法对最终产品确实没有帮助，因为当定量结果为负值时，用户会产生 "洁净度 "的错觉。

提示 4

"第四个技巧是流程应易于使用"。

从监管的角度来看，流行率永远是衡量消费者风险的关键要素，量化并不是要完全取代流行率。它更像是一种增值。在考虑既要满足监管需求又要收集更多信息的过程中，在整个过程中使用相同的样本确实有助于节省时间和劳动力资源。

"利用单一样本是我们设计 Hygiena 协议的根本原因，我们的协议简化了工作流程，只需对样本进行一次设置，就能同时得到量化结果，告诉我样本是否呈阳性，是否存在高风险；或者样本呈阴性，是否需要继续检测，以管理监管风险。量化的价值并不在于破坏正常流程。如果你增加了更多的资源、成本或人力，这最终真的是增值吗？数据仍然是非常有价值的，但如果因为流程的原因而难以收集，那就会变得令人望而却步。我们需要的是动态的数值数据，而不仅仅是 1 和 0 或正负数"。

如果在实验室中不那么容易做到，那么行业和公司可能会退回到只做最低限度的流行，而这并不是食品安全所需要的。

提示五

"最后一个提示是查看数据"。

对于任何方法来说，用验证或核查的数据来证明成功都是非常重要的，这样才能确保供应商和方法开发人员尽职尽责。

"使用 PCR 进行定量检测的好处在于，检测方法的核心部分已经过验证，即以 1 CFU/样本的水平检测病原体的流行程度，这比定量检测更加困难。由于所有的包容性和排他性都已通过检查，我们所要做的就是使用已经建立的微生物学工具进行量化。

不仅要看到数据，还要真正了解数据量以及如何收集和比较数据。仅使用 10 个样本进行开发或验证是不够的，至少要使用 30 个样本才能产生统计相关性，并在与参考方法的比较中获得信任，但这是绝对最低限度。

总结

我们思考量化问题的方式，以及您可能在行业和政府部门听到的所有这些问题和评论背后的原因，就是要确保您拥有自己的知情信息和意识。

"利用单个样本是我们在 Hygiena 设计工作流程的根本原因，在这个流程中，只需设置一次样本，就能得到两个量化结果，告诉我样本是否呈阳性，是否存在高风险；或者样本呈阴性，是否需要继续检测，以管理监管风险。量化的价值并不在于破坏正常流程。如果你增加了更多的资源、成本或人力，这最终真的是增值吗？数据仍然是非常有价值的，但如果因为流程的原因而难以收集，那就会变得令人望而却步。我们需要的是动态的数值数据，而不仅仅是 1 和 0 或正负数"。

如果在实验室里做起来不那么容易，那么行业和公司可能会退回到只做最低限度的流行病学研究，而这并不是食品安全所需要的。