Explicado por especialistas: As 5 principais dicas de quantificação que o senhor precisa saber

Bem-vindo à primeira série "Explicado por especialistas" com a gerente de produtos globais da MDx, April Englishbey.

Vamos direto ao assunto e aprender sobre quantificação.

"Eu estive a bordo da quantificação e lancei comercialmente o primeiro método (ou kit) de quantificação, o SalQuant™, e acompanhei todo o processo. Por isso, gostaria de compartilhar algumas experiências e atributos como cliente, o que o senhor deve procurar para perguntar ao seu fornecedor sobre quantificação.

Como alguém com experiência prática no desenvolvimento de quantificações para o setor, gostaria de compartilhar os componentes críticos que consideramos quando iniciamos o desenvolvimento de qualquer tipo de quantificação, bem como a forma como ela funciona para o setor, a fim de cumprir a meta de reduzir o risco do consumidor."

Dica 1

"A primeira é a flexibilidade dos dados. Com os dados que o senhor pretende capturar e usar, pense no que realmente quer saber. Quando o senhor obtém um resultado de 5,7 CFU por/g, como o senhor realmente usa isso como uma ferramenta de tomada de decisão? Essa é uma parte da descoberta consultiva que fazemos com os clientes para chegar à raiz de como o senhor precisa utilizar as informações adicionais."

Saber a resposta a essas perguntas ajuda a decidir qual dos dois tipos de quantificação o senhor precisa com base na flexibilidade e na finalidade dos dados.

A verdadeira quantificação, como a SalQuant, utiliza um ponto de tempo identificado de incubação associado a um software para determinar o número de bactérias na amostra original.
Os testes de limites simplesmente identificam quando ocorre um positivo em um ponto de tempo especificado, indicando que o número de bactérias é maior do que o limite definido. Às vezes, esse estilo de teste também é conhecido como semiquantitativo, mas os testes de limites e limiares são um pouco menos confusos.

É muito importante entender realmente que tipo de dados o senhor está procurando e como tomaria uma decisão usando esses dados! No final das contas, o método que o senhor está usando tem a flexibilidade de utilizar uma única amostra ou protocolo para realizar testes de quantificação ou de limites?

Dica 2

"A segunda ferramenta são as opções de matriz dinâmica.

A segurança dos alimentos não se resume aos produtos finais; na maioria das vezes, essas amostras são o foco principal. No entanto, o processamento e a pré-colheita também fazem parte da equação com a qual o senhor deve se preocupar para gerenciar todo o domínio da segurança de alimentos.

Quando começamos essa jornada, há três anos, desenvolvemos a quantificação para produtos finais e coletamos ótimos dados, MAS ainda precisávamos descobrir por que as bactérias ainda sobreviviam depois de todas as intervenções aplicadas ao longo do processo.

Se pudermos limpar a parte inicial da produção de animais e alimentos, teremos uma chance maior de remover a Salmonella em todo o processo e reduzir esse risco. É por isso que podemos ver indústrias e influenciadores não apenas coletando dados do produto final, mas adicionando pontos de dados consistentes ao longo de seus processos e avaliando verdadeiramente se as intervenções estão funcionando. Também continuamos a trabalhar de trás para frente até os níveis de fazenda ou pré-colheita para medir onde podemos impactar a carga de Salmonella que entra e o que sai."

Procurando fornecedores que tenham a robustez de seu método para trabalhar com variedades de matrizes e até mesmo com amostras sujas, como rehang versus enxaguados pós-resfriamento, ambos ainda são enxaguados, mas verificando se o método funciona devido à natureza da "sujeira".

Nem todas as amostras são iguais, mesmo que pareçam semelhantes, portanto, é importante garantir que as verificações tenham sido realizadas para que o senhor possa ver os dados.

Dica 3

"O número três é o intervalo enumerável mais amplo.

Os métodos precisam ser capazes de chegar tanto à extremidade inferior (1 UFC) quanto à extremidade superior (10.000 UFC) da faixa de quantificação, porque precisamos de flexibilidade com base no tipo de amostra e também quando há uma falha crítica que ocorre com o crescimento descontrolado de bactérias."

Dentro dos programas de segurança alimentar, sabemos que às vezes haverá um valor discrepante (baixo ou alto) e o método precisa ser capaz de quantificar em comparação com o relatório de um intervalo negativo ou maior que o enumerável, o que não é um ponto de dados útil.

"Gosto de usar o exemplo do enxágue, como mencionei na dica 2, para que o controle do processo passe de sujo para limpo. Poder quantificar que antes da intervenção havia um grande número de bactérias e que depois da intervenção ainda há um resultado positivo, mas em uma quantidade muito baixa, sabendo que ainda é detectável e quantificável, é importante para medir de fato a eficácia do processo e das intervenções."

É realmente importante entender que a expectativa de um produto final é o mais limpo e, na maioria das vezes, sem patógenos. Os resultados não devem estar em níveis altos, como 100 CFU/g ou mL. Até mesmo 10 CFU/g pode ser muito alto, dependendo do setor. Os métodos que têm um limite inferior de quantificação de apenas 100 UFC/g realmente não são úteis em um produto final, pois o usuário terá uma falsa sensação de "limpeza" quando a quantificação for vista como negativa.

Dica 4

"A quarta dica é que o processo deve ser fácil de usar."

Do ponto de vista regulatório, a prevalência sempre será um componente essencial para medir o risco para o consumidor; a quantificação não se destina a substituir totalmente a prevalência. É mais um valor agregado. Quando se pensa no processo de atender às necessidades regulatórias, mas também de coletar mais informações, utilizar a mesma amostra durante todo o processo é realmente útil em termos de tempo e recursos de trabalho.

"A utilização de uma única amostra é essencialmente o motivo pelo qual projetamos nossos protocolos na Hygiena para ter um fluxo de trabalho simplificado, em que a amostra pode ser configurada uma vez para obter ambos os resultados de quantificação, que me dizem se minha amostra é positiva com um alto risco ou, alternativamente, é negativa e preciso continuar a prevalecer para gerenciar o risco regulatório. O valor da quantificação não deve atrapalhar os processos normais. Se o senhor está adicionando mais recursos e mais custos ou mão de obra, isso é realmente um valor agregado no final das contas? Os dados ainda são muito valiosos, mas se forem tão difíceis de coletar por causa do processo, eles se tornarão proibitivos. Precisamos ter dados dinâmicos que sejam dados numéricos em vez de apenas uns e zeros ou positivos e negativos."

Se não for tão fácil fazer isso no laboratório, os setores e as empresas poderão voltar a fazer apenas o mínimo de prevalência, o que não é o que precisamos fazer para a segurança dos alimentos.

Dica 5

"A última dica é ver os dados."

Para qualquer método, comprovar o sucesso com dados de validações ou verificações é muito importante para garantir que os fornecedores e desenvolvedores de métodos tenham feito a devida diligência.

"A vantagem de usar a PCR para quantificação é que os ensaios já foram validados para o componente principal de detecção do patógeno em um nível de 1 UFC/amostra para prevalência, o que é mais difícil do que a quantificação. Como todas as caixas já foram verificadas para inclusão e exclusividade, tudo o que estamos fazendo é adicionar a quantificação usando ferramentas já estabelecidas para microbiologia."

O senhor não deve apenas ver os dados, mas realmente entender a quantidade de dados e como eles foram coletados e comparados. Apenas desenvolver ou validar usando 10 amostras não é suficiente, no mínimo 30 amostras criam relevância estatística e confiança nas comparações com os métodos de referência, mas isso é um mínimo absoluto.

Vamos encerrar

A maneira como pensamos sobre a quantificação e os motivos por trás de todos esses tipos de perguntas e comentários que o senhor pode ouvir no setor e no governo é garantir que o senhor tenha suas próprias informações informadas e consciência.

"A utilização de uma única amostra é essencialmente o motivo pelo qual projetamos nossos protocolos na Hygiena para ter um fluxo de trabalho simplificado em que a amostra pode ser configurada uma vez para obter ambos os resultados de quantificação, que me dizem se minha amostra é positiva com um alto risco ou, alternativamente, é negativa e preciso continuar a prevalecer para gerenciar o risco regulatório. O valor da quantificação não deve atrapalhar os processos normais. Se o senhor está adicionando mais recursos e mais custos ou mão de obra, isso é realmente um valor agregado no final das contas? Os dados ainda são muito valiosos, mas se forem tão difíceis de coletar por causa do processo, eles se tornarão proibitivos. Precisamos ter dados dinâmicos que sejam dados numéricos em vez de apenas uns e zeros ou positivos e negativos."