Extração de DNA/RNA

Como funciona a extração de DNA/RNA?

Como uma importante etapa preparatória, a homogeneização e o enriquecimento adequados da amostra garantem que o material de teste seja adequadamente preparado e concentrado para uma extração eficaz de DNA/RNA.

1. Lise: O processo de extração de DNA/RNA começa com a lise (lise de células para extração de DNA ou lise de partículas de vírus para extração de RNA), uma etapa crucial em que as células ou partículas da amostra são quebradas para liberar seus ácidos nucleicos. Isso pode ser feito por meio de vários métodos, incluindo o tratamento enzimático (usando enzimas como a proteinase K), o rompimento mecânico (como o batimento de esferas ou a homogeneização) ou agentes químicos (como detergentes ou soluções alcalinas). O objetivo da lise é romper efetivamente a membrana celular, a parede celular ou a partícula de vírus, permitindo que o ácido nucleico (DNA ou RNA) contido nas células seja liberado na solução. Essa etapa é essencial para acessar o material genético necessário para a análise posterior.
2. Opcional: Purificação do extrato: após a lise, o extrato geralmente contém uma mistura de ácidos nucleicos com proteínas, lipídios e outros resíduos celulares. A purificação do extrato é uma etapa opcional, mas importante, que isola o DNA ou o RNA desses contaminantes, garantindo que os ácidos nucleicos sejam de alta pureza e adequados para testes moleculares precisos. A purificação pode ser realizada por meio de vários métodos, como a ligação dos ácidos nucleicos a uma matriz sólida (ou seja, colunas de sílica), precipitando-os com álcool ou usando esferas magnéticas. O extrato purificado é então lavado para remover quaisquer impurezas residuais e, por fim, eluído em um tampão ou água, deixando uma amostra limpa de DNA ou RNA pronta para análise posterior. Essa etapa é particularmente importante ao executar reações de PCR em tempo real downstream a partir de extratos complexos, como células eucarióticas, que exigem ácidos nucleicos altamente puros para obter resultados precisos e confiáveis.

Os métodos personalizados de extração de DNA/RNA oferecem várias vantagens importantes para a detecção de contaminantes e para garantir a segurança de amostras ambientais e de alimentos usando PCR em tempo real.

• Otimizados para diferentes tipos de amostras: As amostras de alimentos e ambientais podem variar muito em sua composição, exigindo métodos de extração especializados para lidar com diferentes matrizes de forma eficaz. Os métodos personalizados de extração de DNA/RNA são projetados para trabalhar de forma eficiente com uma ampla variedade de tipos de amostras, garantindo que, independentemente de o senhor estar testando um produto alimentício complexo ou uma superfície ambiental, possa extrair de forma confiável os ácidos nucleicos necessários para uma análise de PCR precisa.
• Maior eficiência e consistência: As soluções de extração personalizadas otimizam seu fluxo de trabalho, reduzindo a possibilidade de erros e garantindo resultados consistentes em vários testes e tipos de amostras. Essa maior eficiência garante que seus processos de teste sejam confiáveis e reproduzíveis, o que é essencial para manter altos padrões de segurança e qualidade.
• Compatibilidade com sistemas automatizados: Como os laboratórios de testes recorrem cada vez mais à automação para melhorar o rendimento e reduzir o trabalho manual, os métodos personalizados de extração de DNA/RNA podem ser projetados para se integrarem perfeitamente aos sistemas automatizados de PCR. Essa compatibilidade permite o processamento de alto rendimento, reduzindo o tempo e o esforço necessários para a preparação de amostras e, ao mesmo tempo, mantendo a precisão e a confiabilidade dos resultados.

A seleção do método adequado de extração de DNA/RNA é fundamental para atender às necessidades específicas de seus processos de teste. As necessidades dos clientes podem variar muito, exigindo soluções personalizadas que ofereçam conveniência, resultados confiáveis e o potencial de automação. Quer o senhor esteja lidando com testes de rotina ou precise de um método que se integre perfeitamente a um fluxo de trabalho automatizado, o método de extração correto garantirá a preparação precisa e eficiente da amostra.

Diferentes matrizes de teste, como produtos alimentícios complexos ou amostras ambientais, podem apresentar desafios significativos durante a extração. Essas matrizes podem variar muito em sua composição, exigindo métodos especializados para quebrar efetivamente as células e isolar os ácidos nucleicos. As soluções de extração sob medida são projetadas para lidar com essas matrizes difíceis, garantindo que até mesmo as amostras mais desafiadoras produzam DNA ou RNA de alta qualidade para uma análise de PCR confiável.

Ao escolher o método de extração correto, o senhor pode otimizar seus processos de teste, reduzir possíveis erros e garantir que seus resultados sejam consistentemente precisos, independentemente do tipo de amostra.^® Os kits de detecção BAX® System vêm com um método de lise integrado, permitindo o uso direto do extrato na execução da PCR em tempo real. Os kits de detecção foodproof^® oferecem uma variedade de etapas de extração especializadas para atender a determinadas necessidades dos clientes, como isolamento de alta pureza, procedimentos de teste manuais de alto rendimento ou totalmente automatizados.

Os kits foodproof podem ser usados quando o isolamento de alta pureza é importante, por exemplo, para matrizes difíceis, como chocolate, que podem interferir na PCR, ou como uma etapa de verificação adicional quando os resultados de outros ensaios de PCR não são claros.

Os protocolos de PCR em tempo real do BAX® System incluem uma etapa para a lise otimizada induzida por calor das paredes celulares de patógenos, permitindo o uso direto do extrato na reação de PCR.

A linha de produtos foodproof utiliza uma abordagem modular que permite ao usuário escolher a solução ideal para cada etapa do procedimento de teste de PCR em tempo real para amostras ambientais e de alimentos. Em contraste com os kits BAX® System, o procedimento foodproof separa a extração de DNA/RNA da etapa de detecção de PCR em tempo real para fornecer soluções especializadas para cada necessidade do cliente. Para permitir que os kits de PCR em tempo real à prova de alimentos não apenas detectem microrganismos, mas também vírus e alérgenos, identifiquem espécies animais e façam a triagem e a identificação de OGMs, os kits de extração múltipla à prova de alimentos são projetados para aplicações especializadas:

• A extração adequada de DNA/RNA é uma etapa crucial de preparação para obter resultados confiáveis de testes baseados em PCR em tempo real
• Nossas linhas de produtos oferecem opções para diferentes métodos de extração de DNA/RNA para uma ampla variedade de matrizes
• Vários ensaios certificados e validados por terceiros

A linha de produtos do sistema BAX^®

• A lise celular/isolamento de DNA é uma etapa integrada em todos os ensaios de PCR do BAX® System
• Pode ser usado para a detecção rápida e conveniente de patógenos em uma ampla variedade de matrizes
• Projetado para a detecção quantitativa e qualitativa de patógenos em uma ampla variedade de matrizes alimentares
• Ensaios validados para quantificação dos principais agentes patogênicos, como Salmonella, Campylobacter, Listeria e E. coli
• Compatível com o processamento semi-automatizado usando o Hygiena^® Prep Express

A linha de produtos^® foodproof

• A extração de DNA/RNA é uma etapa separada com kits de extração adicionais adaptados às necessidades específicas do cliente
  • foodproof StarPrep Kits: para purificação personalizada de DNA de bactérias (patógenos e organismos de deterioração) para baixo a alto rendimento de amostras manuais
  • foodproof Sample Preparation Kits: para purificação personalizada de DNA de células eucarióticas (para detecção de alergênicos, triagem e identificação de OGMs, identificação de animais) e purificação de RNA (para detecção de vírus)
  • Kits de preparação magnética foodproof: para purificação de DNA semi-automatizada e totalmente automatizada usando as estações de trabalho da série RoboPrep®.
• Podem ser usados como uma etapa adicional de verificação quando os resultados dos testes com os kits BAX® System não são claros
• Devem ser usados quando for importante um isolamento de alta pureza, por exemplo, amostras com componentes inibidores de PCR