Extracción de ADN/ARN

¿Cómo funciona la extracción de ADN/ARN?

Como paso preparatorio importante, la homogeneización y el enriquecimiento adecuados de la muestra garantizan que el material de ensayo esté adecuadamente preparado y concentrado para una extracción eficaz de ADN/ARN.

1. Lisis: El proceso de extracción de ADN/ARN comienza con la lisis (ya sea lisis celular para la extracción de ADN o lisis de partículas de virus para la extracción de ARN), un paso crucial en el que las células o partículas de la muestra se rompen para liberar sus ácidos nucleicos. Esto puede lograrse a través de varios métodos, incluido el tratamiento enzimático (utilizando enzimas como la proteinasa K), la disrupción mecánica (como el batido de microesferas o la homogeneización) o agentes químicos (como detergentes o soluciones alcalinas). El objetivo de la lisis es romper eficazmente la membrana celular, la pared celular o la partícula vírica, permitiendo que el ácido nucleico (ADN o ARN) contenido en las células se libere en la solución. Este paso es esencial para acceder al material genético necesario para el análisis posterior.
2. Opcional: Purificación del extracto: Tras la lisis, el extracto suele contener una mezcla de ácidos nucleicos junto con proteínas, lípidos y otros restos celulares. La purificación del extracto es un paso opcional pero importante que aísla el ADN o el ARN de estos contaminantes, asegurando que los ácidos nucleicos sean de alta pureza y adecuados para pruebas moleculares precisas. La purificación puede realizarse mediante varios métodos, como la unión de los ácidos nucleicos a una matriz sólida (es decir, columnas de sílice), precipitándolos con alcohol o utilizando perlas magnéticas. A continuación, el extracto purificado se lava para eliminar cualquier impureza residual y finalmente se eluye en un tampón o en agua, dejando una muestra limpia de ADN o ARN lista para su posterior análisis. Este paso es especialmente importante cuando se realizan reacciones de PCR en tiempo real a partir de extractos complejos, como las células eucariotas, que requieren ácidos nucleicos muy puros para obtener resultados precisos y fiables.

Los métodos de extracción de ADN/ARN a medida ofrecen varias ventajas críticas para detectar contaminantes y garantizar la seguridad de las muestras alimentarias y medioambientales mediante la PCR en tiempo real.

• Optimizados para diferentes tipos de muestras: Las muestras alimentarias y medioambientales pueden variar mucho en su composición, por lo que requieren métodos de extracción especializados para manejar las distintas matrices con eficacia. Los métodos de extracción de ADN/ARN a medida están diseñados para trabajar eficazmente con una amplia gama de tipos de muestras, garantizando que, tanto si está analizando un producto alimentario complejo como una superficie medioambiental, pueda extraer de forma fiable los ácidos nucleicos necesarios para un análisis PCR preciso.
• Mayor eficacia y consistencia: Las soluciones de extracción personalizadas agilizan su flujo de trabajo reduciendo la posibilidad de errores y garantizando resultados coherentes en múltiples pruebas y tipos de muestras. Esta mayor eficiencia garantiza que sus procesos de análisis sean fiables y reproducibles, lo que resulta esencial para mantener unos elevados estándares de seguridad y calidad.
• Compatibilidad con sistemas automatizados: A medida que los laboratorios de pruebas recurren cada vez más a la automatización para mejorar el rendimiento y reducir el trabajo manual, los métodos de extracción de ADN/ARN a medida pueden diseñarse para integrarse perfectamente con los sistemas automatizados de PCR. Esta compatibilidad permite un procesamiento de alto rendimiento, reduciendo el tiempo y el esfuerzo necesarios para la preparación de las muestras y manteniendo al mismo tiempo la precisión y fiabilidad de sus resultados.

Seleccionar el método de extracción de ADN/ARN adecuado es crucial para satisfacer las necesidades específicas de sus procesos de análisis. Las necesidades de los clientes pueden variar mucho y requieren soluciones a medida que ofrezcan comodidad, resultados fiables y posibilidades de automatización. Tanto si se trata de pruebas rutinarias como si necesita un método que se integre perfectamente en un flujo de trabajo automatizado, el método de extracción adecuado le garantizará una preparación precisa y eficaz de las muestras.

Las distintas matrices de ensayo, como los productos alimentarios complejos o las muestras medioambientales, pueden plantear retos importantes durante la extracción. Estas matrices pueden variar mucho en su composición, lo que requiere métodos especializados para descomponer eficazmente las células y aislar los ácidos nucleicos. Las soluciones de extracción a medida están diseñadas para manejar estas matrices difíciles, garantizando que incluso las muestras más complicadas produzcan ADN o ARN de alta calidad para un análisis PCR fiable.

Al elegir el método de extracción adecuado, puede optimizar sus procesos de análisis, reducir los posibles errores y garantizar que sus resultados sean siempre precisos, independientemente del tipo de muestra. Los kits de detección del sistema BAX^® vienen con un método de lisis integrado, que permite el uso directo del extracto en la ejecución de la PCR en tiempo real. Los kits de detección foodproof^® ofrecen una variedad de pasos de extracción especializados para satisfacer ciertas necesidades de los clientes, como el aislamiento de alta pureza, el alto rendimiento manual o los procedimientos de análisis totalmente automatizados.

Los kits foodproof pueden utilizarse cuando el aislamiento de alta pureza es importante, por ejemplo, para matrices difíciles como el chocolate que pueden interferir con la PCR, o como un paso de verificación adicional cuando los resultados de otros ensayos de PCR no son claros.

Los protocolos de PCR en tiempo real del BAX System incluyen un paso para la lisis optimizada inducida por calor de las paredes celulares de los patógenos, lo que permite el uso directo del extracto en la reacción de PCR.

La línea de productos foodproof utiliza un enfoque modular que permite al usuario elegir la solución óptima para cada paso del procedimiento de análisis por PCR en tiempo real de muestras alimentarias y ambientales. A diferencia de los kits BAX System, el procedimiento foodproof separa la extracción de ADN/ARN del paso de detección por PCR en tiempo real para ofrecer soluciones especializadas para cada necesidad del cliente. Para que los kits de PCR en tiempo real foodproof no sólo detecten microorganismos, sino también virus y alérgenos, identifiquen especies animales y criben e identifiquen OMG, los múltiples kits de extracción foodproof están diseñados para aplicaciones especializadas:

• La extracción adecuada de ADN/ARN es un paso de preparación crucial para obtener resultados fiables de las pruebas basadas en la PCR en tiempo real
• Nuestras líneas de productos ofrecen opciones para diferentes métodos de extracción de ADN/ARN para una amplia variedad de matrices
• Múltiples ensayos certificados y validados por terceros

La línea de productos BAX^® System

• La lisis celular/aislamiento de ADN es un paso integrado en cada ensayo de PCR del BAX System
• Puede utilizarse para la detección rápida y cómoda de patógenos en una amplia variedad de matrices
• Diseñado para la detección cuantitativa y cualitativa de patógenos en una amplia variedad de matrices alimentarias
• Ensayos validados para la cuantificación de patógenos clave como Salmonella, Campylobacter, Listeria y E. coli
• Compatible con el procesamiento semiautomatizado mediante el Hygiena^® Prep Express

La línea de productos foodproof^®

• La extracción de ADN/ARN es un paso independiente con kits de extracción adicionales adaptados a las necesidades específicas del cliente
  • Kits StarPrep foodproof: para la purificación de ADN a medida a partir de bacterias (patógenos y organismos de deterioro) para un rendimiento de muestras manual de bajo a alto
  • Kits de preparación de muestras foodproof: para la purificación de ADN a medida a partir de células eucariotas (para la detección de alérgenos, el cribado y la identificación de OMG, la identificación de animales) y la purificación de ARN (para la detección de virus)
  • Kits de preparación magnética foodproof: para la purificación semiautomatizada y totalmente automatizada de ADN utilizando las estaciones de trabajo de la serie RoboPrep®.
• Pueden utilizarse como paso de verificación adicional cuando los resultados de las pruebas con los kits BAX System no son claros
• Deben utilizarse cuando es importante un aislamiento de alta pureza, por ejemplo, muestras con componentes inhibidores de la PCR